流式单标是否需要固定和封闭

如果染pi或膜内是需要固定的，你做膜表面不用固定，但是还是要封闭一下的。

1. 免疫组化中封闭的目的是为了防止抗体和抗原之间的电荷吸附所造成的非特异性着色，用流式做直接免疫荧光染色也是抗原抗体反应，必然也存在因电荷吸附造成的抗体的非特异结合。理论上应该封闭。

2.用流式作细胞直接免疫荧光染色因为没有信号放大过程，所以这种非特异的抗体吸附可以忽略不计，而在免疫组化中，信号经一次甚至两次放大，非特异结合所造成的影响就难以忽略了，有必要进行必要的处理——封闭。

固定会改变抗原的空间结构，有些抗体的识别会受到影响。所以染细胞表面抗原的都不要固定。