相关实验：含有多聚组氨酸标签重组蛋白纯化实验
我也不知道Z2ZO
2022-03-22
天一湖医者
a可能原因：超声功率不合适(太大，蛋白碳化，太小，蛋白没完全释放)
解决方法：改变超声功率或者其它方法破碎细胞。
b.样品或缓冲液不合适
解决方法：确保缓冲液中螯合剂，还原剂，咪唑浓度不是很高。
c.His标签暴露不完全
解决方法：在缓冲液中加变性剂(4-8M尿素，4-6M盐酸胍)，然后用IMAC介质纯化。
d.His标签丢失
解决方法：必要时增加His的个数并确保正确表达，同时降低上样速度，确保足够的孵育时间。
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问
sdspage跑胶方法有marker条带但是没有样品蛋白条带原因
his标签的蛋白过柱子，洗脱不下来，洗脱液咪唑浓度已经达到0.5M。
利用Ni－NTA纯化蛋白的buffer，里面的咪唑成分大概能保存多久？
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