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raw264.7细胞由IL-4诱导向M2型极化的方法

相关实验:小鼠巨噬细胞极化的诱导及鉴定

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我想问下各位大佬,有没有比较好的IL4诱导raw264.7向M2型极化的方法?具体浓度和孵育时间是怎样?细胞的状态需不需要注意什么?是无血清孵育还是含有血清孵育?求助

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4 个回答

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高山云初

有帮助

10ng/mL IL-4作用12小时诱导其极化。

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周末也要努力呀

有帮助

可以使用以下方法:

1. 培养基准备:使用DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基,添加10%胎牛血清(FBS)和1%青霉素/链霉素。

2. 细胞培养:将RAW264.7细胞在培养皿中以37°C、5% CO2的条件下培养至80-90%的密度。

3. 细胞处理:将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次,然后加入IL-4(10 ng/ml)处理培养基中。将细胞继续培养24-48小时。

4. 细胞采集:将培养皿中的细胞用PBS洗涤一次,然后用细胞刮刀将细胞从培养皿上刮下。

5. 细胞检测:使用流式细胞术或免疫荧光染色等方法,检测M2型巨噬细胞标记物,如CD206(Mannose Receptor)和Arginase-1等。



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橙汁儿青柠味

有帮助

一般是20ng/ml直接加到培养基里诱导24h

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

一般是20ng/ml,IL4诱导孵育24h

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