实验小白
本人实验小白,没有做过免疫组化实验,有好几个问题想请教大佬们
6只正常大鼠分别取五个不同组织,观察五种不同的基因(或蛋白)在不同的组织中的定位:
1.切片我应该切几张合适呢?我看文献里大多是用该种方法看某种蛋白的表达,并未查到三色定位呢。而且人家都设有模型组,药物组等等,我只有正常组,就是要在正常大鼠中观察染色定位呢
2.用免疫组化法中的什么方法对我的这个实验有利呢?这我应该怎么查资料呢?
dxyc42u
第一次做的话建议先搞预实验,做几个片子试一试,后面一个基因搞一张片子
skyye
1.免疫组化染色一张片子染一个蛋白分子,所以你有5个蛋白的话,那每个组织就至少需要5张片子。第一次染的话,尽量按每个蛋白说明书给的推荐一抗浓度进行染色,不确定的话可以对一抗浓度做个梯度,算上预实验的话就每个组织需要切更多片子了。
2.可以查询中国知网或者其他数据库,按照其他文章中染过这个蛋白的免疫组化的方法来进行染色会更好点。
huarenqiang5
建议每个组织最好切15-20张白片。
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