dxy_kgnqpm9r
求助各位大佬!!
想用qPCR检测THP-1诱导巨噬细胞分型
M2:MMR下降
M1:IL-6上升但是iNOS下降,两者不匹配,是什么问题呢?
dxyc42u
建议排查下qpcr复孔差异大的时候容易出现这种结果
土井挞克树
一般来说,thp1与 IFN-γ(20 ng/ml)和LPS(100 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M1极化。 与 IL-4(20 ng/ml)和IL-13(20 ng/ml)孵育48小时以上,使其向M2表型极化。二者结果相反可能是诱导孵育时间不足的原因
loveliufudan
存在几个潜在的问题:
1. 分型标记物选择:M1和M2型巨噬细胞分泌的细胞因子和表达的标记物有一定的差异。您选择的标记物(MMR、IL-6和iNOS)可能仅适用于特定情况下的巨噬细胞分型。建议您仔细检查文献和相关研究,确保所选择的标记物在您的实验条件和巨噬细胞分型中是合适的。
2. 细胞处理方法:M1和M2型巨噬细胞分型的结果可能受到细胞处理方法的影响。例如,细胞处理的时间、浓度和刺激剂的选择都可能影响分型结果。确保您在实验中使用的处理条件是与文献或已建立的方法一致的。
3. 分型的复杂性:巨噬细胞分型是一个复杂的过程,受到多种因素的调控。M1和M2型巨噬细胞之间的分型标记物表达可能存在交叉调控或变化。在某些情况下,某些标记物的表达可能与预期的模式不完全匹配。这可能是由于细胞类型、环境因素、激活剂的浓度和时间等多种因素的综合影响。
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