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我们使用TGF-β 10ng/mL刺激巨噬细胞,造模组和对照组CCK-8是没有差异的,但是有文献表明,这个浓度是可以引起细胞凋亡,为什么我们做的cck-8造模组细胞数没有减少呢?
毛利小五郎的徒弟
文献的浓度是参考浓度,建议你提高浓度直到测出阳性
loveliufudan
这可能与多种因素有关:
1. 时间点:TGF-B1的作用可能需要一定的时间才能表现出细胞数的减少。您可能需要更长的刺激时间,或者在不同时间点进行检测,以观察是否存在细胞数减少的现象。
2. 细胞类型:巨噬细胞的响应和敏感性可能因细胞系的不同而有所差异。RAW264.7细胞可能对TGF-B1的刺激具有一定的耐受性,导致细胞数没有明显的减少。在不同的巨噬细胞系或原代巨噬细胞中进行进一步的实验,可以检查是否存在细胞数减少的效应。
3. 细胞状态:细胞的状态和活力可能影响其对刺激物的反应。如果细胞状态不理想,例如细胞密度过高或细胞死亡率较高,可能会影响观察到的效应。确保在进行实验之前,细胞处于适当的状态和密度。
4. 其他因素的影响:TGF-B1的作用受到多种因素的调控,包括细胞的环境、信号通路和细胞内分子的相互作用。其他因素可能在您的实验条件下干扰了TGF-B1的效应,导致细胞数没有减少。进一步的实验和分析可能需要考虑这些因素。
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