提pbmc做流式胞内染色，刺激5小时后贴壁细胞消化不下来

可以考虑以下几个方面来解决问题：

调整胰酶浓度和消化时间：尝试使用不同浓度的胰酶和不同的消化时间，以找到最佳的消化条件。

尝试其他消化酶：胰酶可能不是最适合消化PBMC的酶，您可以尝试其他消化酶，例如，Trypsin-EDTA、Collagenase、DNase等。

使用细胞分离液：使用细胞分离液可以更加有效地分离PBMC，并消化贴壁细胞。常用的细胞分离液有Ficoll-Paque、Histopaque等。

调整刺激条件：在刺激PBMC前，调整刺激时间、浓度、类型等参数，以减少贴壁细胞的产生。

使用磁珠分选：使用磁珠分选方法可以更加有效地从混合细胞中分离PBMC，避免了贴壁细胞的产生。

建议胰酶里面添加一些edta混合消化。