Yanice0928
最近做巨噬细胞吞噬实验,中性红孵育1h,PBS清洗两次后,加入细胞裂解液(无水乙醇:乙酸=1:1),在室温放置2h后,LPS组OD540比对照还要低,显微镜下观察好像细胞都没有裂解,求问是什么原因呀,有在做这个实验的大神嘛?!!
sswei
原因有:
1. 过度消化,某些用于组织分解的酶,如胰蛋白酶,如果过量使用会导致细胞结块;
2. 环境压力,物理压力和反复的温度变化会导致细胞死亡,从而导致细胞的“粘性”的DNA分子将相邻的细胞连接在一起;
3. 组织分解,在制备单细胞悬浮液时,使用酶、机械或化学分解策略可使细胞破裂,从而导致碎片的聚团;
4. 过度生长,当细胞在其培养基中密度过大的时候,细胞将开始溶解并释放碎片,碎片中的粘性因子会将细胞聚集到一起;
5. 污染,某些细菌和真菌病原体导致细胞溶解,结块通常是细胞培养物被污染的迹象
毛利小五郎的徒弟
增加裂解时间,或者更换裂解液。
loveliufudan
有以下几个可能的原因:
溶液配制或处理不当。细胞裂解液是影响细胞溶解效果的关键因素之一。可能是由于溶液配制比例不正确或者处理时间不够,导致细胞无法完全裂解。
细胞状态不佳。细胞状态不佳也可能导致吞噬实验的结果不准确,例如细胞密度过高、细胞分离方法不当、细胞培养时间过长等,都可能会影响细胞的生长和代谢,从而影响实验结果。
中性红染色不充分。中性红染色是吞噬实验中的关键步骤,如果中性红染色不充分,就可能影响后续的实验结果。建议您检查中性红染色的时间、浓度、温度等因素是否正确,以确保吞噬效率的准确性。
实验条件不稳定。实验条件的不稳定性也可能导致实验结果不准确,例如温度、湿度、pH值、氧气含量等都可能影响细胞的生长和代谢。建议您在实验中控制这些因素,以确保实验条件的稳定性。
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