【请教】双抗夹心层析，阴性阳性区分不开

考虑是包被的问题，夹心包被的程度不够所以分不开

有几种可能的原因：

特异性抗体的质量存在问题：可能特异性抗体没有正确地结合到支持物上，或者抗体质量存在问题，导致其与目标蛋白质的结合亲和力较弱，从而使阴性和阳性之间的差异无法区分。

样品垫处理液的成分存在问题：您的样品垫处理液中包含四硼酸钠、酪蛋白钠、S9和PVP10。其中，四硼酸钠通常用于缓冲和维持样品的pH值，酪蛋白钠用于协助特异性抗体结合到目标蛋白质上，S9可以防止非特异性蛋白质与特异性抗体结合，而PVP10可以防止蛋白质的非特异性吸附。如果样品垫处理液中这些成分的浓度或配比存在问题，可能会影响到阴性和阳性之间的区分。

其他实验条件存在问题：除了特异性抗体和样品垫处理液之外，其他实验条件，如温度、盐浓度、pH值等，也可能会影响到阴性和阳性之间的区分。