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miRNA靶向mRNA的3’-UTR,可以用FISH来证明两者的靶向关系吗?

相关实验:长链非编码RNA的研究策略及技术

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3 个回答

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土井挞克树

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可以做FISH来验证靶向关系,先验证关系再验证通路。

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sswei

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可以用FISH来证明两者的靶向关系。

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loveliufudan

有帮助

miRNA可以通过结合靶向mRNA的3'-UTR来调节其表达。FISH(荧光原位杂交)是一种检测核酸序列的技术,通常用于检测RNA在细胞中的位置和数量。然而,FISH本身不能直接证明miRNA与靶向mRNA的3'-UTR存在靶向关系。

为了证明miRNA与靶向mRNA的3'-UTR存在靶向关系,可以使用以下实验技术:

免疫共沉淀(IP)实验:将具有亲和性的抗体与目标蛋白质结合,然后通过共沉淀来检测miRNA和靶向mRNA的相互作用。

RNA干扰(RNAi)实验:通过引入小干扰RNA(siRNA)或miRNA模拟物来靶向沉默特定的基因,以检测靶向mRNA的表达是否受到miRNA调控。

3' UTR-Luciferase报告基因实验:在目标基因的3'-UTR区域构建Luciferase报告基因,并在细胞中表达,然后观察miRNA是否通过结合靶向mRNA的3'-UTR来调节Luciferase的表达。

因此,尽管FISH不能直接证明miRNA与靶向mRNA的3'-UTR存在靶向关系,但可以使用其他实验技术来证明它们之间的相互作用。

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