组织芯片做多重免疫荧光如何避免组织脱离?

脱蜡前进行水化，可以防止组织脱离

在进行多重免疫荧光分析时，为了避免组织脱离，您可以尝试以下方法：

1.正确选择切片厚度：通常，组织芯片的切片厚度为4~5μm。过厚的切片会导致组织无法充分固定在载片上，而过薄的切片则容易断裂或脱离。因此，选择合适的切片厚度对于避免组织脱离非常重要。

2.固定和处理样本：在进行免疫染色前，必须对组织芯片中的样本进行固定和处理。固定过程需要使用适当的固定液（如4%的多聚甲醛或4%的乙醛），以确保组织与载玻片充分接触并牢固固定。在处理样本时，需要避免组织芯片中的样本受到过度机械性剪切或力量，因为这些操作可能导致组织脱离或变形。

3.选择合适的荧光染色条件：在进行多重免疫荧光分析时，需要选择合适的染色条件，以确保荧光染料充分渗透并固定于组织中。通常，建议使用较低浓度的荧光染料和较短的染色时间，同时可以在染色过程中加入胶原蛋白或牛血清蛋白等蛋白质作为辅助剂，以帮助固定组织和减少背景噪音。

4.适当的洗涤和溶解步骤：在进行多重免疫荧光分析后，需要对组织芯片进行洗涤和固定处理。在这个过程中，需要避免使用过强的清洗剂或过度力量来防止组织脱离。同时，在离子洗涤之后，可以使用气溶胶定型剂或类似的溶解剂来保持组织的稳定性。

Poly-L-Lysine(多聚赖氨酸)为目前组织芯片免疫组化 染色工作中正常用的一种防脱片剂，6ml的多聚赖氨酸溶液可按1:10稀释成60ml的工作液，适合于需要酶消化、微波、高温高压的防脱片处理。如不行，可用双重处理（APES和Poly-L-Lysine）的切片。在以上两种条件都行不通的情况下，可用如下方法：切片在脱蜡前，放在APES 1：50 丙酮溶液中浸泡3分钟，晾干，即可