组织芯片申免疫荧光染色的定量分析

组织芯片申免疫荧光染色的定量分析

组织芯片(tissue chip)技术是一种快速、经济及高通量的现代组织化学技术。组织芯片又称组织微阵列(tissue mlcroarray，TMA)，它是将数十个乃至数以千计不同来源的组织样品粘贴到同一张固相载体如玻璃片或硅片上，形成组织微阵列。

在同一反应条件下进行免疫组织化学染色，以了解病变组织与相应正常组织内蛋白质等抗原的细胞来源、分布特征和表达差异等。它的最大便利之处在于可以对大量组织标本同时进行检测，可缩短检测时间，减少不同染色样品间人为造成的差异，使得各组织或穿刺标本间对某一生物分子的测定更具有可比性。下面我们以实例简要介绍对组织芯片采用免疫荧光组织化学染色(Cy3探针标记)。

组织盘属蛋白酶抑制剂―1（tissue inhibitor of methalloproteinase-1,TIMP-1)广泛存在于各种组织中，在乳腺癌细胞中表达明显增加。采用免疫荧光组织化学技术(Cy3探针标记)对乳腺癌组织芯片中TIMP―1进行染色，并利用生物芯片扫描仪定量分析，可高效率地检测TIMP-1在大量乳腺癌组织中表达的改变。

采用GenePix Personal 4100A型生物芯片扫描仪对组织芯片中各点进行扫描，通过GenePix Pro 5.0分析软件获得每点平均荧光强度值，同时得到组织芯片扫描后经数字化处理形成的组织芯片图像)。SP法免疫组织化学染色的组织芯片用ImagePro-Plus图像分析系统测定每点平均灰度值。

对两种方法所得结果比较显示，两者呈明显正相关，表明组织芯片免疫荧光组织化学染色结果采用生物芯片扫描仪扫描，对受检蛋白相对含量进行定量分析，具有快速简便、客观准确和高效的特点。但是生物芯片扫描仪不能观察到组织结构，因此，待测物质在组织中的定位还必须依赖于荧光显微镜下人工观察。

生物芯片扫描仪扫描图像

乳腺癌组织芯片组织金属蛋白酶抑制剂―1免疫荧光组织化学染色(Sp法。Cv3标记。在蓝光光谱波长激发呈绿色荧光

普通荧光显微镜下图像

乳腺癌组织芯片中组织金属蛋白酶抑制剂―1免疫荧光组织化学染色(～3标记，在绿光光谱波长激发呈红色荧光