免疫荧光双重标记问题？

如果非特异性程度高的话，那一般出现双重标记的可能性比较低

选取一抗时，要求来源于两种不同的动物。二抗则是不同荧光信号标记的。每次试验均需设置以下三种对照：

(1) 阳性对照：阳性血清+荧光标记物;

(2) 阴性对照：阴性血清+荧光标记物;

(3) 荧光标记物对照：PBS+荧光标记物。以提高准确性。

在免疫荧光双重标记实验中，如果一抗选择了小鼠IgG1和IgG2，二抗选择的是与它们不同的动物（比如兔子）产生的抗体，一般情况下不会发生交叉反应，因为二抗只识别一抗中的Fc区，而不会受到抗原特异性的影响。但是，如果你使用的二抗是多克隆的抗体混合物，其中包含能够交叉反应的抗体，则可能会发生交叉反应，这需要在实验中进行验证和排除。另外，为了更好地分辨两种抗原的信号，你需要使用不同的荧光染料或者使用不同波长的激光来激发和检测两种染色信号。