如何使用细胞回收液从基质胶上提取细胞

1. 将VitroGel Cell Recovery Solution温至37℃。

2. 将细胞从培养箱中取出，吸出覆盖在水凝胶上面的培养基，用DPBS洗涤水凝胶两次。

3. 向孔中加入1mL VitroGel Cell Recovery Solution，并用刮刀将水凝胶从孔板上分离。

4. 加入5mL VitroGel Cell Recovery Solution于15mL锥形离心管中，并将水凝胶转移到离心管中。

可选:用1mL VitroGel Cell Recovery Solution冲洗孔，并将溶液转移至离心管中。

5. 将离心管摇动20次，再将离心管放回水浴中2-3min。重复这个循环3-5次。(根据凝胶强度和细胞类型优化摇摆时间和重复次数)。

6. 在室温下以100×g离心3-5min，收集细胞沉淀。(根据不同细胞类型优化离心机的速度和时间)。

可选:如果细胞沉淀上还有水凝胶，用5mL VitroGel Cell Recovery Solution重悬细胞，再次重复步骤5 - 6。

把细胞回收液收取后先分离纯化后再放到基质胶提取。

下面是一个基本的步骤：

将细胞回收液预先冷藏或根据生产商的说明制备。

从培养皿中移除基质胶，并用 PBS 等缓冲液洗涤细胞，去除细胞培养基和血清等。

向基质胶中加入足够的细胞回收液，使其覆盖所有基质胶。

在室温下孵育 5 到 20 分钟，让细胞回收液溶解基质胶，并将细胞释放出来。

将细胞回收液和细胞收集在一个离心管中。

将离心管离心，沉淀下来的细胞可以用 PBS 洗涤，以去除残留的细胞回收液和基质胶成分。

用细胞计数器或显微镜等方法计数细胞数目。