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GM-DC诱导失败无数次,求大神指点

相关实验:免疫荧光技术

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dxy_84hgxro5

诱导剂加了TGF-β和GM-CSF,血清也灭活过,但是诱导阳性率只能达到20%左右,求如何改进

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4 个回答

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huarenqiang5

有帮助

建议开始用不含GM-CSF培养至少3小时至几十小时后再加GM-CSF进行。

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土井挞克树

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可以另外添加细胞因子刺激诱导,可以提高诱导率

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sswei

有帮助

需要用免疫反应刺激物使DC细胞成熟。

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loveliufudan

有帮助

GM-DC(基质附着型树突状细胞)的诱导需要考虑到多个因素,以下是一些可能影响诱导效果的因素和改进方法:

细胞来源和状态:GM-DC的诱导需要使用骨髓或外周血单个核细胞作为原始细胞,因此,细胞来源和状态对诱导效果有很大的影响。建议选择来源健康的供体,细胞状态健康的单个核细胞进行诱导。

诱导剂浓度和配比:TGF-B和GM-CSF是诱导GM-DC的两个重要因子,需要合理确定它们的浓度和配比。建议通过比较不同浓度和配比的诱导试剂,选择最优的浓度和配比。

诱导时间和次数:GM-DC的诱导需要在一定的时间内进行,过短或过长的诱导时间都可能影响诱导效果。建议确定最优的诱导时间和次数,例如,在诱导前加入一定的测定时间,选择合适的诱导时间和次数。

细胞培养条件:细胞培养条件也会影响GM-DC的诱导效果,如CO2浓度、pH值、温度、培养基种类等。建议选择适宜的细胞培养条件,以提高GM-DC的诱导效果。

诱导试剂的质量:诱导试剂的质量也会影响GM-DC的诱导效果,包括TGF-B和GM-CSF的质量、配制方式、储存条件等。建议使用高质量的诱导试剂,确保其活性和稳定性。

综上所述,GM-DC的诱导需要考虑多个因素,并进行综合考虑和优化。建议逐步尝试不同的诱导方案,寻找最优的GM-DC诱导方案。

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