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包括阳性对照在内,全部呈阴性反应,原因可能是:①染色未严格按操作步骤进行;②漏加一种抗体,或抗体失效;③缓冲液内含叠氮化钠,抑制了酶的活性;④底物中所加H2O2量少或失效;⑤复染或脱水剂使用不当。
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主要考虑抗体的问题,也有可能是你的标本没有处理好,固定和脱水影响比较大。
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延长荧光染色时间,或者加入促染剂试一试。
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可能有多种原因导致阳性对照标本和待测标本都不着色:
技术问题:可能是实验操作有误,例如固定、脱脂、抗体浓度等步骤处理不当,导致抗原不能被充分暴露或抗体不能很好地结合。
细胞类型:小胶质细胞的抗原表达可能不同于阳性对照标本和待测标本的抗原表达,或者它们的表达量不足以被检测到。
抗体问题:可能是抗体的品质不好或已经失效,或者抗体与特定抗原结合不充分。
检测问题:可能是染色显色过程中的显色液、显微镜、摄影仪等问题,导致不能很好地显示染色结果。
为了确定原因,可以尝试改变实验条件,例如更换抗体、改变染色条件等,以找到导致问题的原因。