ShanJ11D
老师朋友们,我PBMC培养10个小时后,发现底部很多碎片渣渣,去除悬浮换液后,渣渣减少一丢丢。不知这些渣渣是细胞碎片还是什么东西?还是单核细胞培养就是这样?希望老师朋友们指教。
还有一个技巧方面的问题,ficoll梯度离心提取PBMC后,红细胞也吸了不少,有什么方法技巧可以避免或减少吗?因为后续也需要用到悬浮的淋巴细胞做实验。
希望老师朋友们指教。
蓝色箭头是10h后贴壁细胞、黄色箭头是悬浮细胞、橙色箭头是碎片渣渣。
土井挞克树
考虑是细胞碎片,周边可以看见类似崩解的细胞结构
龙大人驾到
这些渣渣很可能是细胞碎片,可能是由于细胞受压力后突然死亡而形成的。单核细胞培养可能会导致一些细胞碎片,但是如果换液后这些碎片减少了,说明换液的操作有助于减少细胞碎片的产生。
loveliufudan
PBMC培养中发生的碎片和渣渣可能是由于细胞死亡和代谢产物造成的,可以考虑更换培养基或改变培养环境,以减少细胞死亡。更换培养基或改变培养环境的方法可以在文献或实验手册中查找。
在Ficoll梯度离心提取PBMC时,红细胞往往也会被吸附,可以通过以下几种方法来减少:
梯度离心的速度和时间:降低离心速度和增加离心时间可以有效减少红细胞的吸附。
增加液体的高度:将梯度增加到管子顶部,以防止红细胞在离心过程中被损坏。
增加梯度的浓度:将Ficoll的浓度增加,以提高细胞的密度,使红细胞在离心过程中沉降到管子底部。
用抗菌剂预处理样品:使用抗菌剂预处理样品可以防止细菌干扰离心结果。
以上方法可以根据实验需要进行灵活选择。
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