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单核和树突细胞培养

相关实验:树突状细胞表型和功能检测

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ShanJ11D

老师朋友们,我PBMC培养10个小时后,发现底部很多碎片渣渣,去除悬浮换液后,渣渣减少一丢丢。不知这些渣渣是细胞碎片还是什么东西?还是单核细胞培养就是这样?希望老师朋友们指教。

还有一个技巧方面的问题,ficoll梯度离心提取PBMC后,红细胞也吸了不少,有什么方法技巧可以避免或减少吗?因为后续也需要用到悬浮的淋巴细胞做实验。

希望老师朋友们指教。

蓝色箭头是10h后贴壁细胞、黄色箭头是悬浮细胞、橙色箭头是碎片渣渣。

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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

考虑是细胞碎片,周边可以看见类似崩解的细胞结构

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龙大人驾到

有帮助

这些渣渣很可能是细胞碎片,可能是由于细胞受压力后突然死亡而形成的。单核细胞培养可能会导致一些细胞碎片,但是如果换液后这些碎片减少了,说明换液的操作有助于减少细胞碎片的产生。

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loveliufudan

有帮助

PBMC培养中发生的碎片和渣渣可能是由于细胞死亡和代谢产物造成的,可以考虑更换培养基或改变培养环境,以减少细胞死亡。更换培养基或改变培养环境的方法可以在文献或实验手册中查找。

在Ficoll梯度离心提取PBMC时,红细胞往往也会被吸附,可以通过以下几种方法来减少:

梯度离心的速度和时间:降低离心速度和增加离心时间可以有效减少红细胞的吸附。

增加液体的高度:将梯度增加到管子顶部,以防止红细胞在离心过程中被损坏。

增加梯度的浓度:将Ficoll的浓度增加,以提高细胞的密度,使红细胞在离心过程中沉降到管子底部。

用抗菌剂预处理样品:使用抗菌剂预处理样品可以防止细菌干扰离心结果。

以上方法可以根据实验需要进行灵活选择。

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