荧光定量PCR，模板浓度够高，CT仍30多，原因何在
清澈的微风
real time RT-PCR，测了模板cDNA浓度1800ng/ml，纯度在1.96左右，但是检测内参GAPDH，CT值都有30多，目的基因的CT更大了。请问问题在哪里，CT值大不就是因为模板量不够吗，可是现在这个浓度显然是充足的，怎么解释？
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4 个回答
曙光karry
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cdna应该做一个10倍浓度梯度稀释，做3-4个梯度，上样1-2ul
李亚彪111
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这种情况就要考虑抑制扩增的问题了，要么浓度高，要么反应体系中有抑制物，要么反应体系有效成分讲解了
bamboopiggy
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你的cdna太浓了，稀释到20ng/ul，上1ul就可以
毛利小五郎的徒弟
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可以把模版适量稀释后再做定量p c r
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