DNA模板浓度的检测

• 实验目的

了解紫外分光光度计检测的原理。检测所提取DNA模板的浓度。
二、实验原理
若OD ₂₆₀ ／OD ₂₈₀ 比值大于2.0，说明存在RNA。可再用RNA酶处理。酚－氯仿－异戊醇(25；24：1)提取，乙醇沉淀和洗涤DNA。
若OD ₂₆₀ ／OD ₂₈₀ 比值小于1.80，说明存在蛋白质或酚等杂质。可用CTAB提取液消化3小时，重新用酚一氯仿一异戊醇抽提，除去蛋白质等杂质，直至比值接近1.80。
若OD ₂₆₀ ／OD ₂₈₀ 比值等于1.80，小于2.0说明所提DNA非常纯净。
三、实验器材
紫外分光光度计 比色杯   移液枪
四、实验试剂
DNA模板  0.1XTE
五、实验操作
   1、按照操作标准打开 仪器 。调零，设置检测浓度比例。
2、用移液枪先取0.1xTE 45ul,加入比色杯，再取 DNA模板5ul加入比色杯，用移液枪轻轻搅动，使其混匀。
3、按比色杯上箭头所指，放入 仪器 ，按smaple 键，
4、记录DNA模板浓度数值。
六、实验结果：
   

序号	浓度	260/280	260/230
1
2
3

 

七、注意事项：
1、 比色杯 的放置
2、溶液的混匀
3、 比色杯 的清洗，以免样品之间的污染。