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为什么我的肠道石蜡切片HE染色送绒毛隐窝完整片段很少?

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dxy_gy7crym8

我的是21天断奶小鼠的肠道样品,取了十二指肠,空肠,回肠,每取一段肠,会在培养皿里用1ml枪吸取PBS冲洗一两次,再放到多聚甲醛里固定,可做完HE染色发现绒毛隐窝完整的结构很少,不是病理模型鼠,是正常喂养的小鼠,是我操作的问题吗?还是说刚断奶的小鼠肠道很脆弱,不能用PBS冲洗?

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5 个回答

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Dr_劉医生

有帮助

不是PBS冲洗的问题,21天,也就3周龄的幼鼠消化系统本来就没发育好,肠道绒毛结构很少

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huarenqiang5

有帮助

虽然刚断奶的小鼠肠道很脆弱但是可以用PBS冲洗。你这个考虑是操作的问题。

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土井挞克树

有帮助

不要反复清洗,固定时间不要太长,肠道绒毛容易被破坏

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balalaLy

有帮助

可能是石蜡切片制备过程有问题,

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天一湖医者

有帮助

可能原因,(1)取材时组织太厚,固定过久,导致深部组织固定不佳,而表浅组织过度固定,而透明、脱水、浸蜡均是如此,这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。(2)制片过程有问题,切片厚薄不一,或者有刀痕,或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一,一般都是在制片时,刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳(一般最佳角度为5°)(3)脱蜡前未烘烤,脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久,导致脱蜡不彻底。(4)染色液过少,着色不均匀;或染色时部分组织干涸而另一部分湿润,这样会导致组织吸附染料的能力不一。(5)分化不当。

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