求助！求一个RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染protocol

相关实验：小鼠腹腔巨噬细胞分离及纯化

甜味玻璃碴

2022-11-07

组里面没有师兄师姐做双染，所以来这里寻求有经验的师兄师姐帮下忙😢拜托拜托😭

1 个回答

土井挞克树

2022-11-09

有帮助

做RAW264.7巨噬细胞极化CD86和CD206流式双染、RAW264.7细胞形态不好时的处理方法

1.倒掉旧的培养基，加入3ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。

2.把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次，20分钟，30分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。