LPS刺激THP-1，炎症模型一直建不起来，求助🆘
科研菜鸟米雪
求助各位大神，我用PMA100nM，48小时把THP-1分化成巨噬细胞，再用LPS1ug/ml刺激THP-1,3小时，做了ELISA，炎症还挺明显的，但是做WB没趋势，甚至炎症组比对照组还低了，是什么原因呀?怎么改进呢？
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2 个回答
huarenqiang5
有帮助
个人感觉THP-1细胞比较敏感，容易受到外界的刺激，即使是更换血清和1640培养基的品牌也需要一周左右时间适应，有时可能会出现自动贴壁的情况。推荐使用进口血清和进口1640，且细胞适应后不要随意更换。
土井挞克树
有帮助
WB测不出来的话，建议你提RNA，逆转，qPCR检测一下这个iNOS 有没有变化。如果iNOS没有上调，很有可能是激活失败，如果iNOS上调了，可以考虑NO检测的问题。
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