如果目标蛋白是膜蛋白或是胞浆蛋白，操作需要注意什么？

提蛋白根据蛋白表达位置可以选择对应的裂解液，如提胞浆蛋白的裂解液，提膜蛋白裂解或全细胞裂解液，操作上常规的注意事项那就是冰浴裂解，蛋白酶抑制剂,PMSF(磷酸化蛋白检测时磷酸酶抑制剂cocktail)等

如果目标蛋白是膜蛋白或胞浆蛋白，所用的去垢剂就要温和得多。目前市面上有专门针对亚细胞组分的蛋白抽提试剂盒，可以高效的富集到活性蛋白。

在选用去垢剂应选择温和的。比如NAF

如果是膜蛋白和胞浆蛋白，所用的去垢剂要温和得多，这时最好加上NaF去抑制磷酸化酶的活性；部分膜蛋白不好提取，尤其是亚细胞器的膜蛋白。