我爱科研啦
最近在做WB,培养的细胞,进行裂解处理。但是有个蛋白跑出来,条带很细,感觉都没法用来定量了(如下图)。上样量从5增加到了15,还是这样,请问一下各位,这大概是什么原因造成的?
官方提醒QKZG
如果增加上样量还是这样,有可能是目的蛋白含量低了。
申东熙老伯
增加上样量还是这样就是转膜时间太久蛋白被转过了。
balalaLy
换一个loading buffer试一下,或者用15孔的胶。其实这样也不影响定量的。
Eason老歌迷
如果条带很细,考虑是不是样品里目的蛋白太少了。或者是你的转膜条件有问题,蛋白没有完全转过来。
NatureBios
最上面的印记是目的蛋白印迹么,从图片结果看,蛋白印迹是可以用的,如果希望更强的印迹,可以从增加上样量,提高一二抗的浓度和更换更灵敏的显影液这几个方面着手
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