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16kD的蛋白湿转条件

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dxy_kntx84v

各位大神 我要做iba1 蛋白16kD和GAPDH内参。现在配的胶是5%浓缩胶 12.5%的分离胶 。请问湿转的条件怎样比较好

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8 个回答

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dxy_nzwl73o5

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100v 一个小时,恒压条件下。

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bocardio5927

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胶的浓度没问题,350mA 恒流转1-2小时都可以,0.22微米的pvdf膜

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whilt-shirt

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可以用200mA转膜1h试试。

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bamboopiggy

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胶的浓度ok,用0.45um的nc或pvdf膜,300mA,转1.5h,ok

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申东熙老伯

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湿转的话200mA恒流转45min-1小时就可以了。

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dxy_kntx84vuser-title

我用了200mA转了45min 内参稍微有点少 但也转上去了 谢谢你

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你好几和户

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一般用12%的胶,当然15%的胶也是可以的,只要你不嫌慢。电泳和转膜都是按常规条件,比如电泳电压80v-120v,只要不跑到太下面。转膜,小孔径的pvdf膜一般不怕转膜转过头,一般用250mA 2小时。

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我用的Bio-Rad的湿法转移,转膜的电压是100V,1h后即可

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balalaLy

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12%的胶可以跑了,pvdf膜72v 1.5-2h

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