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yanlai000
有人做过小鼠脾脏的th17、treg流式吗,需不需要加佛波酯/离子霉素混合物、布雷非德菌素 A/莫能霉素混合物诱导分化并阻断因子分泌?图片这个方案不诱导阻断,一次上机就能把th17和treg都测出来了结果可靠谱吗?急求专业人士解答,提前感谢!!!
汤姆卜丽波
Monensin等阻断剂是Na+的离子载体。细胞经其处理之后,Na+、H+梯度被破坏,并且高尔基体的转运和分泌被阻断,新合成的蛋白从而滞留和浓缩在细胞内。分泌型蛋白(如细胞因子IFN-γ/IL-4/IL-17a等),在做流式检测时都应提前用Monensin或者同类的BFA(布雷福德菌素)处理4个小时以上方可检测。
秋秋欣欣
流式细胞术仅能检测细胞内的抗原,但是活化的T细胞会将多种细胞因子分泌至细胞外,因此需要阻断细胞因子分泌至细胞外。
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