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丁香通

想请问检测细胞凋亡率除了流式还有什么方法吗?

相关实验:基于流式细胞术检测细胞凋亡

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只想顺利读博

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5 个回答

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bamboopiggy

有帮助

检测凋亡的方法有好多,但是建议还是流式检测,因为最方便。其他的方法包括:

Caspase-3活性检测

Caspase(cysteinyl-aspartic acid proteases)蛋白家族的活化是细胞凋亡的特征,在介导细胞凋亡过程中具有重要的作用。其中Caspase-3作为关键的执行分子在细胞凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常细胞中以酶原形式存在,在凋亡早期被的活化,但在凋亡晚期及死亡细胞中,Caspase-3活性下降。因此在试验过程中可以通过检测检测Caspase剪切体的含量或Caspase的活性来反应细胞凋亡过程。

DNA损伤检测

在细胞凋亡的后期,Caspase会激活Caspase-Activated DNase(CAD),切割核小体之间的DNA,形成以180-200 bp为单位的DNA片段,经琼脂糖电泳后形成DNA ladder。

缺点:耗时,无法定量,以及结果不稳定

DNA片断原位标记法(TUNEL检测细胞凋亡)

细胞死亡(凋亡或坏死)时,DNA发生断裂。此时大量的粘性 3'-OH 末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到 DNA 的 3'- 末端,从而可进行凋亡细胞的检测。

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天一湖医者

有帮助

荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜,一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。

线粒体膜势能的检测,线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位(Δψm)的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA 断裂)出现之前,一旦线粒体跨膜电位崩溃,则细胞凋亡不可逆转。

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府宅

有帮助

可以使用细胞DNA提取物的DNA梯状带电泳实验等

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dxy_gwrp7ndq

有帮助

检测细胞凋亡的方法有电子显微镜或者光学显微镜下的形态学观察

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未来9

有帮助

检测细胞凋亡率的主要方法

一、形态学观察方法

1、HE染色、光镜观察:

2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:

3、台盼蓝染色:

4、透射电镜观察:

二、DNA凝胶电泳

三、酶联免疫吸附法(ELISA)核小体测定

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