免疫组化两步法和三步法有什么优缺点呀？

三步法是一般是最常用的免疫组化方法，敏感度高高的，操作上面也十分简便。如果组织内源性生物素过高，就容易造成了假阳性显色。内源性生物素在肝，肾组织中的含量尤其多，在脾、胰、脑、乳腺、子宫内膜和骨骼肌等组织中也广泛存在，因此，避开内源性生物素的感染，才最为关键。

二步法利用多聚HRP代替了Bioten，这一招移花接木，从技术上克服了组织内源性生物素造成的非特异性的背景染色。

二步法在避免了生物素干扰的同时，其操作简便、反应敏感迅速，目前已逐步取代S-P法，成为科研实验、临床病理诊断中的主流技术。

二步法操作更加简单方便，阳性检出率更高，在诊断C-MET弱表达患者时漏诊率低，得到结果的时间更短，所以适合用于临床病理诊断。

三步法虽然实验耗时比较长，但实验结果较好，明确易读，活合科学研究。二步法较易出结果，灵敏度较高，阳性强度高，较易出背景着色，假阳性率高，故不适于科学研究，但因为操作方便,检出阳性宰较三步法高,对于ERa -36弱表达的病例不容易漏诊，且能较快出结果，故可考虑在临床病理诊断中选择应用。

三步法制片结果的阳性率和背景低,非特异性着色小,结果比较明确易读;而与三步法相比较,二步法的操作更加简单方便,检查阳性率和阳性强度更高