煤球儿啊
重做一次比较好,新片子重做比较好
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首先考虑你的抗体里是不是加了叠氮纳,这个可是不能用DAB的。
蛋白大小,如果分子量不大的话转膜液里要增加甲醇的含量,以增加和膜的结合能力。在不引起背景的情况下增加一抗的浓度,另外也有可能你的目的抗原被封闭剂给屏蔽了,可以降低浓度或者换一种,也有可能是表达量太低,用ECL发光法试试
府宅
可能是DAB变质,DAB最好现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。
可能是抗体浓度过低或孵育时间过短(最好一抗 4ºC 过夜);也可能是就是封闭时间过长。