在免疫组化制片的时候有什么办法能让组织完整无刀痕？脑组织切片厚度多少才是最佳的？

想要免疫组化制片的时候让组织完整无刀痕，必须保持切片刀锐利，切片要薄而平整、无皱摺、无刀痕，如有上述问题的切片在进行免疫组化染色都将出现假阳性现象，切片厚度一般为3~4μm，切好的切片在60℃温箱中过夜，注意烤片的温度不宜过高，否则易使组织细胞结构破坏，而产生抗原标记定位弥漫现象

切片角度和刀片新旧程度对切片效果的影响较大，切片角度视切片机型号而异；新刀片容易切出完好的切片。大鼠大脑要做免疫组织化学的话，需要把细胞切开，抗体容易进到胞质（如果是胞核染色则需要进一步核膜打孔，跟细胞膜打孔一样，常用triton x-100），一般神经细胞的胞体的大小差异很大，小的直径仅5～6μm，大的可达100μm以上，结合文献会发现，经常切30um或者20um，这样可以切开多数的细胞

脑组织需要较厚（尤其是取新鲜标本冰冻制片时），常规都要6-8um最佳，冰冻可切至10um。神经组织的研究要求切片厚度在20-100μm，有利于追踪神经纤维的走行。