含有目的基因的质粒转入大肠杆菌感受态后涂平板，培养12个小时不长，24小时才长，菌落少且小为什么？

50ul感受态用2ul质粒溶液就可以了，太多了反而导致转化效率降低，可能造成你这种情况

多了解一下是不是感受态细胞数量不足或者质量不好，目的基因的表达高不高，生长环境适不适合细菌生长繁殖。

是不是转化效率低造成的，可以尝试优化转化的方法和条件

原因可能是：

    质粒过大？平板不新鲜？平板抗生素浓度高？

建议老师：

1. 可以挑取菌落，同时划线培养，做个菌落PCR反应，跑胶看是否有目的条带；

2. PCR有目的条带的话，提取质粒，进行酶切鉴定，跑胶看目的条带是否和预期一样；

3. 上面都没问题后，测序看目的基因序列；

4. 没问题后，大提质粒，保存。

有可能是LB平板中的卡娜抗生素浓度比较高导致菌长的小而慢，可以把菌做个pcr鉴定

转的质粒的量不是用体积加的，100ng以内

可能是感受态的大肠杆菌太少了所以长得慢，可以提高接种量

24h才长时间有点长了，有可能是杂菌。可以挑菌做个菌液pcr或者送测序验证一下

在你描述的实验条件下，涂平板培养12个小时没有生长，而在24小时才有生长，而且菌落少且小的情况可能有以下原因：

转化效率低：转化效率是指成功将质粒导入大肠杆菌感受态细胞中的能力。如果转化效率较低，即只有少数感受态细胞成功转化并带有目的基因的质粒，那么在平板上形成的菌落数量就会较少。

抗性基因表达较弱：你提到平板是卡纳霉素（卡那霉素）抗性的，而目的基因可能与该抗性有关。如果转入的质粒中的目的基因的表达较弱，或者需要一定时间才能表达，那么菌落的生长会受到限制，因此菌落可能较小。

菌落生长需要更长时间：某些大肠杆菌菌株在含有抗生素的平板上生长速度可能较慢，因此需要更长的时间才能形成可见的菌落。

关于你提到的涂板后生长24-36小时的菌是否含有目的基因，通常需要进一步进行确认。你可以进行菌落PCR或筛选方法（如PCR鉴定或酶切分析）来确定是否存在目的基因。这些方法可以验证你所得到的菌落是否确实带有你感兴趣的目的基因。

需要注意的是，为了确保实验结果的准确性，建议进行技术复制和实验对照，并对结果进行验证和分析。