甘油农杆菌（带质粒）涂板一个晚上就长出来了

正常一个晚上是可以长出来的，可能是菌的浓度高长出来的密度很大。

农杆菌生长的速度常在48小时，涂板下出现死菌的可能较大。

一般农杆菌长的比较快，下面的一层考虑是死菌。

如果您的甘油菌在涂板上长出来了，且形态正常、菌落均匀，那么应该是转化成功了，涂板和划线两种方法均可。

至于涂板下面糊了一层的情况，有可能是因为在涂板过程中使用的工具或培养基存在细菌污染，也可能是因为保存的甘油菌中存在死菌。建议在操作涂板前使用无菌技术，包括工具、培养基、试管等都需要用高温高压灭菌或紫外线消毒，以减少污染的可能性。此外，在保存的甘油菌中，存在一定比例的死菌是正常的，但如果死菌过多也会对转化效果产生影响。

一个晚上长出来是正常情况，一般最迟不能超过48小时。你也可以重做一次，并且设计一个阳性和一个阴性对照，大肠杆菌是转化后的一般12-16h 可出现单菌落，最长不超过20h；农杆菌约48小时。而且，菌落数目还和其它条件有关：如菌种类型、抗性、培养条件、感受态的制备，甚至每个人操作手法不同都会导致结果不同。