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标准蛋白质溶液浓度过低会怎样?

相关实验:基于蛋白质化学呈色反应测定蛋白质总含量

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dxy_2du0zt02

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1 个回答

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凌晨三点Dxy

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可能会出现以下几个问题:


1. **灵敏度降低*:Lowry法的灵敏度可能会受到影响,因为该方法的测定范围通常为1-10mg蛋白质。如果标准蛋白质溶液浓度过低,可能无法达到这个测定范围的下限,从而导致无法准确检测到样品中的蛋白质含量。

2. **线性关系受影响*:Lowry法依赖于在一定浓度范围内,所形成蓝色的深浅与蛋白质含量之间的线性关系。如果标准蛋白质溶液浓度过低,这种线性关系可能会受到影响,导致无法准确计算出样品中的蛋白质浓度。

3. **显色反应不完全*:Lowry法的显色原理是基于蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2+反应,生成紫红色Cu+复合物,然后在Folin-酚试剂的作用下,产生深蓝色的钼蓝和钨蓝混合物。如果标准蛋白质溶液浓度过低,可能会导致显色反应不完全,从而影响最终的颜色强度和测定结果。

4. **干扰物质的影响放大*:在Lowry法中,某些物质如硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等可能会干扰测定。如果标准蛋白质溶液浓度过低,这些干扰物质的影响可能会相对放大,进一步影响测定结果的准确性。

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