原核表达重组质粒测序正确，构建成功，但是双酶切验证跑不出条带 这是为啥

有可能，也可以从下面原因考虑：

1. 酶切条件不正确：双酶切验证需要使用适当的酶切缓冲液和温度来进行酶切反应。如果酶切条件不正确，可能导致酶切不完全或者根本没有酶切产物。建议检查酶切反应条件是否正确，并根据酶切酶的推荐条件进行优化。

2. 酶切位点有变异：双酶切验证需要确保目标序列中存在预期的酶切位点。如果目标序列中的酶切位点发生了变异，可能导致酶切不完全或者根本没有酶切产物。建议重新检查目标序列的酶切位点是否正确，并根据需要设计新的引物。

3. DNA质量不佳：如果DNA质量不佳，可能会影响酶切反应的进行。建议使用高质量的DNA样本，并确保DNA在酶切反应前经过适当的纯化和浓缩。

4. 酶切产物太小或太大：双酶切验证需要产生预期大小的酶切产物。如果酶切产物太小或太大，可能无法在凝胶电泳中显示出来。建议检查目标序列的大小，并根据需要调整酶切反应的条件。

有这个可能性，牌子不一样之间会存在一定的差异。

有可能，也有可能是因为质粒没提出来啊或者切得太少