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在ELISA定量或半定量检测中,如何选择合适的检测二抗或检测方式?

相关实验:ELISA 实验

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dxy_2zf2ycg2

  • 将AAV病毒以静脉注射的方式给药猴子;
  • 检测猴子产生的抗AAV抗体,即免疫原性检测;
  • 选择抗猴的特异性HRP-二抗或通用型HRP-重组蛋白G二抗进行检测,两者的差异是否会影响阴阳性的判断;
  • 一般检测ADA是通过桥连法,以保证检测的特异性;直接用商品化的二抗检测和用桥连法进行检测是否有特异方面的影响?
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3 个回答

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dxyc42u

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一般来说,二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠源的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗(山羊抗小鼠或者兔抗小鼠等均可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。

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于小鱼鱼1998

有帮助

二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,二抗来源一些特殊实验,如双标实验中需要多注意,需要选择与两个一抗都不同来源的第三个种属二抗也可以使用

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loveliufudan

有帮助

在ELISA定量或半定量检测中,选择合适的检测二抗或检测方式可以根据以下几个方面考虑:

1. 目标分析物和样本类型:确定您要检测的目标分析物是什么,以及样本类型是什么。根据目标分析物的种类和性质,选择合适的检测二抗。对于检测猴子产生的抗AAV抗体,您可以选择抗猴的特异性HRP二抗或通用型HRP-重组蛋白G二抗。

2. 特异性和交叉反应:检测二抗的特异性是非常重要的。确保选择的检测二抗能够特异地结合目标分析物,而不会与其他非特定抗体发生交叉反应。这有助于准确判断阴阳性。

3. 检测灵敏度:不同的检测二抗可能具有不同的检测灵敏度。根据您的实验需求,选择适当灵敏度的检测二抗。这将有助于您获得可靠的定量或半定量结果。

关于ADA检测,使用桥连法或直接商品化的二抗检测可以影响特异性的判断。桥连法具有较高的特异性,可以减少非特定抗体的干扰。但是,使用商品化的二抗进行直接检测可能更简便和快速。根据您的实验需求和准确性要求,选择适当的方法进行ADA检测。

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