dxy_nmj97n55
带的标签是GFP,转膜后阴性对照空空如也,阳性都只出现了二十多的标签条带(目前猜测是)。但是都没有我的目的条带呀哭哭,目的条带是七八十大小,请问现在到底是什么原因呢?标签掉了?
loveliufudan
首先,标签掉落是一个可能的原因。如果标签没有正确地与目的蛋白质结合,或者在转膜过程中丢失,那么您可能无法观察到您期望的目的条带。您可以尝试检查转膜条件是否正确,例如转膜时间和电流密度。
另外,如果目的蛋白质表达水平较低,那么在凝胶中可能只能观察到较弱的条带。您可以尝试增加样品的负载量,或者尝试优化电泳和转膜条件以增强目的条带的信号。
此外,实验中的其他因素,例如抗体的质量和稀释倍数,以及蛋白质的纯度和稳定性,也可能对结果产生影响。确保您的实验操作准确无误,并重复实验以验证结果的一致性。
土井挞克树
考虑是目的蛋白降解了或者上样量过低
sswei
一是目的蛋白表达量过低,无法达到 WB 检测下限;二是在样品制备过程中,目的蛋白发生了丢失。