Zhdw90
过表达慢病毒感染悬浮细胞,对照组明显荧光,实验组看到微弱荧光,WB不表达,感染贴壁细胞实验组看到明显荧光,WB也有表达,我需要感染悬浮细胞,求支招,有大神遇到这种情况吗
loveliufudan
这种情况下,可以尝试以下方法来改善在悬浮细胞中的慢病毒感染效率和表达:
1. 提高感染效率:悬浮细胞通常比贴壁细胞更难感染。您可以尝试以下方法来提高感染效率:
• 优化感染条件:包括感染剂的浓度、感染时间和感染温度等参数。您可以尝试不同的组合来寻找最佳条件。
• 使用增效剂:某些化合物或蛋白质可以增强病毒感染效率,例如聚乙烯醇(Polybrene)或微粒(Protamine sulfate)。您可以尝试添加这些增效剂来提高感染效率。
2. 考虑使用其他病毒载体:如果当前使用的慢病毒载体无法有效感染悬浮细胞,您可以尝试其他类型的病毒载体,如腺相关病毒(Adenovirus)或合成的病毒载体(如AAV)。
3. 选择适合的细胞系:不同的悬浮细胞具有不同的感染特性。您可以尝试使用更易感染的细胞系,或者在特定的悬浮细胞系中进行基因转染。
4. 考虑转染技术:如果慢病毒感染仍然困难,您可以考虑其他转染技术,如脂质体转染或电穿孔法等。
sswei
对于悬浮细胞,可采用平角离心感染的方法,减少病毒感染时的体积,从而提升感染的效率。
土井挞克树
你的实验是病毒感染贴壁细胞成功,悬浮细胞感染失败。建议改良悬浮细胞感染步骤,可以适当提高病毒滴度
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