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可能是感染时病毒加入量有点少的原因
土井挞克树
延长感染时间,有时候gfp需要很长时间才能检测到
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GFP慢病毒感染细胞后,荧光强度取决于病毒进入到细胞的颗粒数、细胞本身的增殖状态、细胞类型、观察时间、GFP前的启动子活性等因素。
GFP基因荧光表达的强度与启动子的活性、目的细胞感染的病毒颗粒数呈正相关。慢病毒在增殖较快的细胞中感染48 ~ 72 h(腺病毒则是36 ~ 48 h),GFP蛋白表达才达到峰值;在增殖较慢的细胞中,GFP蛋白表达到达峰值需更久。GFP基因由强启动子启动时荧光表达较强,弱启动子启动则荧光表达较弱。
观察荧光时最好关掉室内灯光,只留荧光显微镜光源。
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