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Coip input和ip组蛋白条带位置不一样是怎么回事?

相关实验:免疫共沉淀(Co-IP)

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skyQ8OW


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5 个回答

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毛利小五郎的徒弟

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1、coip后蛋白条带会迁移是因为在高温的情况下蛋白质之间把对方分开而迁移。2、也可能是因为两个蛋白质有相互作用力。

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sswei

有帮助

ip条带C0ⅰp  input条带不一致及解决步骤:

1、排除IP条带不是IgG的重链和轻链。

2、排除一抗或者二抗没有污染,一般用新配的抗体理论上说IP的条带要和Input的一样。

3、把核酸消解就会变正常。

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loveliufudan

有帮助

对于Co-IP和IP实验中,输入样品和免疫沉淀样品的蛋白质条带位置不同可能有以下几种可能原因:

实验操作问题:如果输入和IP样品的处理和操作不一致,或者在免疫沉淀过程中使用了不适当的条件,可能会导致不同的蛋白质条带位置。

蛋白质修饰状态的影响:输入样品中的蛋白质可能处于不同的修饰状态,而这些修饰可能影响了蛋白质与其他蛋白质的相互作用。

检测灵敏度的影响:不同的检测方法和试剂盒可能对蛋白质的检测灵敏度存在差异,这可能会导致不同的蛋白质条带位置。


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balalaLy

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你的这个抗体不是很好,太多杂带,ip组有条带的位置input组在对应位置也有,只是比较弱,应该以ip的位置为准,但你的ip组的杂带可能是拉蛋白的时候被污染。

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z流沙z

有帮助

首先要排除一下IP样品中轻重链的问题,条带不是轻重链,另外是根据marker判断哪一条符合目的条带的大小,input样品是否充分解聚,因为看起来杂带比较多,可以牛奶封闭久一点,牛奶配制一二抗

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