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WB条带很丑,而且还是皱眉条带?

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dxy_r8ysszr4


蛋白浓度四五百,上样20μL,10%的胶,不清楚为啥条带是这样的,求大佬们指导下,谢谢

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3 个回答

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

蛋白的浓度太大,而且ph也需要调节

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balalaLy

有帮助

蛋白浓度太高了,样品量太大,上个10ul就可以了

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loveliufudan

有帮助

可能由以下几个方面的原因引起:

蛋白质的完整性:如果蛋白质存在降解或者裂解的情况,可能会导致条带的不美观。可以考虑使用蛋白酶抑制剂等方法,保护蛋白质的完整性。

蛋白质的迁移:如果蛋白质没有完全迁移到PVDF膜上,可能会导致条带的不美观。可以考虑增加迁移时间或者使用半干燥法进行膜上电泳。

蛋白质的过量:如果样品中蛋白质含量过高,可能会导致条带过度暗淡或者皱眉条带。可以考虑适当稀释样品或者调整蛋白质负荷量。

胶的质量:如果使用的SDS-PAGE胶质量较差,可能会影响蛋白质的迁移和分离,从而导致条带不美观。可以尝试更换不同质量的胶进行电泳试验。

总之,需要通过综合分析以上几个方面的因素,对实验进行适当的优化和改进。

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