【求助】pErk的条带

很疑惑的一个现象，我在检测细胞内pErk的水平，但是western做出来的条带怎么有时候是两条带有时候是一条带？pErk1/2的表达和细胞培养条件有怎样的关系呢？哪位给些建议啊

一般ERK1的条带比ERK2要弱一点，所以如果你样品没做好或者胶没跑好，上面一条带就可能没有的，只要细胞状态好，ERK表达都很强的，选好你细胞所需的培养条件就可以。

1、提取蛋白时一定要迅速，以免信号丢失，从收获细胞-裂解细胞-蛋白定
量-上样最好在半小时搞定；
2、p-ErK分子量为42与44KD，所以可以选一稍高浓度的gel，曾试过不同浓度
gel，8%时两条带很近，10%可以较清楚分开两条带，12%时两条带分得
很开；
3、by the way，p-ErK在标本中的表达量要考虑进去，如果太多需减少上样
量，不然条带堆积拉不开，表达量少时要多上样，否则加之提取蛋白过
程中丢失的就难检测到带。可以看《Phospholipase Cγ1 signalling regulates li
popolysaccharide-induced cyclooxygenase-2 expression in cardiomyocytes》这篇
paper中的western blot，这是10%gel。

定cell signaling公司的ERK,ERKp的一抗，国内那个公司代理啊？