co-ip一般都选用哪种裂解液？课题组有RIPA（强），还有自己配的强、中、弱的裂解液，应该选哪种比较合适？

一般首次使用应该选择中度的裂解液，避免过度裂解和裂解不充分

强的RIPA比较合适，效果好一些。

只要裂解充分都可以吧，我们做的时候一般是用RIPA

选择裂解液的种类通常需要考虑到样品的特性和实验目的。

对于Co-IP实验，RIPA缓冲液是一种常用的裂解液，它可以有效地裂解细胞膜，并从细胞或组织中提取膜蛋白和可溶性蛋白。但是，RIPA缓冲液的强度较高，可能会破坏蛋白质的结构，导致特定的蛋白质失活或降解，因此需要在实验前进行优化和验证。

自制裂解液通常需要根据样品类型和研究目的进行调整。例如，对于某些细胞或组织类型，需要使用特定的裂解液来获得最佳的裂解效果。此外，不同的裂解液可能会对不同的蛋白质产生不同的效果。因此，需要对每种蛋白质进行优化和验证，以选择最适合的裂解液。

一般而言，如果您的实验中需要保留蛋白质的完整性，则建议使用较为温和的裂解液，如自制的弱裂解液。但是，如果您需要对蛋白质进行完全裂解，则可能需要使用强裂解液，例如RIPA缓冲液。

最终选择裂解液的种类需要结合实验目的和样品特性进行权衡和确定。同时，建议在选择后进行优化和验证，以确保获得最佳的实验结果。

主要是根据你CO-IP的蛋白相互作用的强弱来选择，目前一般用两种裂解液：1.ATM lysis buffer；2.HEPES lysis buffer

第一种的使用比较广泛，大多数的相互作用都能IP下来；第二种对于比较弱的相互作用很有效果。

而且，在你洗agrose时的lysis buffer的Nacl浓度也很重要，一般要高一些洗的比较干净，背景较低。最好是调到150～300mM/L。

可能需要做一下预实验验证一下。一般不能用太强的裂解液，会影响蛋白互作