泛素化co ip一直做不出来

试验步骤：HA-UB和Myc-蛋白A共转染，HA-UB+Myc-蛋白A+flag-蛋白B共转染。主要想看在存在flag-蛋白B的情况下，Myc-蛋白A被泛素化；目前转染30h后换液成MG132，但是做出来IP组要么没条带，要么实验组ladder比对照组弱。