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求助,为啥这His标签蛋白纯化杂带这么顽强呢!

相关实验:免疫球蛋白纯化技术

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生化阿学

红色框里面是目标蛋白,250mM洗脱下来杂带是很少了,可目标蛋白也没了😭

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3 个回答

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juyue2010

有帮助

宿主细胞中,也会有一些蛋白含有多个组氨酸,会造成非特异性结合

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huarenqiang5

有帮助

主要考虑以下几点:

1、洗脱条件太温和。

2、蛋白在柱子中沉淀。

3、非特异性的疏水或者其他作用。

4、蛋白和柱子接触时间过长。

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土井挞克树

有帮助

还是上样量不合适,加大一些上样量试一下

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