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蛋白免疫印迹常用的标签有哪些?如何选择?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_3te3wt5w

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3 个回答

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NatureBios

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标签有HIS HA FLAG GST GFP RFP mCherry等会在蛋白表达时插入到表达体系中,Western blot常用的内参有actin GAPDH Tubulin,针对样本核浆膜提取的样本,也有相应的蛋白做内参

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徐彩云6

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有NusA、TrxA、DsbA等等

NusA标签是一种反转录终止因子,能增加融合蛋白的溶解度和表达;TrxA标签是硫氧还蛋白,几乎存在于所有生物中,它即可能会增加融合蛋白的溶解度,方便地纯化细菌粗周质提取物,也有助于外源基因形成二硫键;DsbA标签是蛋白质二硫键异构酶,能够增加目标蛋白溶解度,有助于形成二硫键。

这三种标签,主要用于改善目标蛋白的表达,本身不用于纯化,必须与另一个亲和标签联用方可实现蛋白质纯化。而且这三种标签均具有细胞周质定位作用,因此一般融合在目标蛋白N端。这三个都属于大标签,可能会影响融合蛋白的性质,一般来说纯化后需要去除。

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huarenqiang5

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常见的蛋白标签包括以下几种:His,Flag,GST,AviTag,c-Myc。(根据其功能,大致可以分为检测标签、表达纯化标签和示踪标签三类。)

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