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GST标签-120kD的蛋白,目标蛋白在红框中,相近区域有两个条带被诱导出,难以判断是哪一个。
蛋白胶显示流穿液中可见有大量蛋白条带,但beads上难以结合,且杂带多,请问如何解决?求助
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可能原因1:洗脱缓冲液的体积太少
解决办法1:增加洗脱缓冲液的体积。
可能原因2:洗脱缓冲液的pH过低
解决办法2:调节洗脱缓冲液pH值至8-9 。
可能原因3:洗脱的时间不够
解决办法3:增加洗脱缓冲液与磁珠反应的时间。
huarenqiang5
降低摇菌温度 18度 20度 。摇一天。降低你IPTG的诱导强度。还有就是是不是PH问题?调整到合适的数值。
土井挞克树
gst部分没有活性的通常很难挂,或者直接取点填料跑电泳看看有没有吸附