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丁香通

请问跑胶时看到条带整体下移,下面没跑开,可能是什么问题?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_945kgle5

如图。

同实验室其他人用同样原料跑出来是正常的。

我之前跑的也是正常的,但是突然就变成这样了。

我和他们不同的习惯是:配好分离胶之后,胶凝好了,就配浓缩胶,然后剩下temed没有加的时候,倒掉封胶的乙醇,用纸巾在边缘吸乙醇,然后再加temed,振均,加浓缩胶。

因为之前天气热,配的胶比较浓,干得很快,有时候我先倒乙醇再配浓缩胶,会导致分离胶的边缘缩胶,所以后来我改成在浓缩胶快配好的时候倒乙醇。

之前这样做的没出过问题。

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3 个回答

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NatureBios

有帮助

我们可以用考染 胶或丽春红染 膜,看看电泳的效果,我们实验室是ap和temed都等到用时再加,整体下移,没有跑开的情况,可能是冷了分离胶凝固不均匀

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

考虑还是胶的问题,调整胶的粘稠度。

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balalaLy

有帮助

你配胶的过程没有问题,上面的marker 也是正常的,所以不存在胶混得不均匀或者没有完全凝这样的问题。下面的蛋白没有跑开只能是胶的浓度太低跑不开。有没有可能你配胶的时候看错了用了低浓度胶的配方

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