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小分子分泌性蛋白要怎么跑啊,一直跑不出来,好烦啊?

相关实验:蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)

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dxy_xrkilsne

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5 个回答

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申东熙老伯

有帮助

提高分离胶浓度,缩短转膜时间。

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dxy_xrkilsneuser-title

都已经变过了,但是还是没用啊

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毛利小五郎的徒弟

有帮助

分泌性蛋白本身胞内含量少,不好跑,需要加大上样量而且小分子量蛋白容易降解,要小心降解。

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dxy_xrkilsneuser-title

我已经加了很多了,起码有60ul,但是还是跑不出来,快要崩溃了。

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NatureBios

有帮助

分泌性蛋白我认为主要样本制备需要多注意下,保证目的蛋白量,电泳参考各分离胶浓度最佳分离范围,膜0.22um 转印电流和时间根据分子量计算,可以根据说明书添加阳性参照,提高一二抗的浓度,显影液使用灵敏度更高的

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dxy_xrkilsneuser-title

我这些都试过了,没有用,是不是考虑用国外的抗体试一试啊

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NatureBios

如果按照阳性参照都没有的话,可以换个品牌的一抗,

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juyue2010

有帮助

蛋白用超滤管浓缩后,再进行wb,转膜时间缩短,用0.22um膜转

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dxy_xrkilsneuser-title

可以问下超滤管贵嘛

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小小小小小芳

有帮助

小分子量的要用浓度大的胶 用百分之十五左右

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dxy_xrkilsneuser-title

我的maker只适合用12%的胶

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