申东熙老伯
提高分离胶浓度,缩短转膜时间。
dxy_xrkilsne
都已经变过了,但是还是没用啊
毛利小五郎的徒弟
分泌性蛋白本身胞内含量少,不好跑,需要加大上样量而且小分子量蛋白容易降解,要小心降解。
dxy_xrkilsne
我已经加了很多了,起码有60ul,但是还是跑不出来,快要崩溃了。
NatureBios
分泌性蛋白我认为主要样本制备需要多注意下,保证目的蛋白量,电泳参考各分离胶浓度最佳分离范围,膜0.22um 转印电流和时间根据分子量计算,可以根据说明书添加阳性参照,提高一二抗的浓度,显影液使用灵敏度更高的
dxy_xrkilsne
我这些都试过了,没有用,是不是考虑用国外的抗体试一试啊
NatureBios
如果按照阳性参照都没有的话,可以换个品牌的一抗,
juyue2010
蛋白用超滤管浓缩后,再进行wb,转膜时间缩短,用0.22um膜转
dxy_xrkilsne
可以问下超滤管贵嘛
小小小小小芳
小分子量的要用浓度大的胶 用百分之十五左右
dxy_xrkilsne
我的maker只适合用12%的胶