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想验证不同细菌感染量对免疫细胞的炎症因子或蛋白的表达,跑wb没跑出来内参的条带是什么原因?目标蛋白跑出来了
juyue2010
查询一下这种细胞常用内参,可能是你稀释比例有问题,或抗体失效
毛利小五郎的徒弟
这种情况一般不会出现,因为内参几乎是在任何组织中都强表达。
1 你的目的、内参的分子量分别是多少?膜的孔径多大,转膜电压及时间?这些都可能影响到条带。如果分子量小,膜孔径大,转膜电压高,时间长,有可能把小分子的蛋白转过。
2 还有一抗稀释度太大,试试减小稀释度,做个一抗梯度
3 不建议封闭过夜,一般封闭一小时
4 一抗一小时以上,然后4度过夜
balalaLy
处理对内参蛋白表达有影响,换一种内参。或者你的抗体失效了 。