快点纯蛋白
用SP柱纯化蛋白后跑WB,分子量变小,发现蛋白可能是从中间断开了😭buffer用的是磷酸体系,求问各位大佬,怎么能避免断开,是和我用的buffer有关吗还是其他原因。
秋秋欣欣
可以减少离子柱与蛋白的结合时间
快点纯蛋白
您好,请问我可以通过加快上样流速来减少结合时间吗,还是其他别的操作呢?
Eason老歌迷
因为Protein A柱的亲和配基在碱性条件下可能会从琼脂糖树脂上脱落断裂,所以一般会选择酸性的洗脱条件。一般会用的洗脱液有醋酸醋酸钠缓冲液,甘氨酸盐酸缓冲液,柠檬酸柠檬酸钠缓冲液等等。所以过proteina柱纯化蛋白会用到醋酸。
快点纯蛋白
您好,目前我用离子柱尝试了磷酸体系和tris体系,结果都出现蛋白断裂的情况,但是之前用his柱就没有出现,请问出现这种情况是因为缓冲体系不合适吗?
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